辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottled virus, PMMoV)是一种RNA病毒，是辣椒作物中最具破坏性的病原体之一，由于其高传染性和在土壤中稳定存在，这种病毒作为水生环境和水处理系统中人类粪便污染的潜在病毒指示物越来越引起人们的关注。最新研究表明，PMMoV在粪便中的检出率与宿主特异性免疫应答存在统计学关联，揭示该病毒可能对人类健康具有潜在致病风险。鉴于PMMoV在污染种子、植物残体、.干壤及水体中表现出极强环境稳定性，其对生态安全、食

品安全及公共健康的潜在威胁正受到日益广泛的关注。我司研发的辣椒轻斑驳病毒（PMMoV）检测试纸条具有无需专业技术人员、简单、快速、准确、无污染、不依赖昂贵检测仪器、肉眼即可判断等优点。

辣椒轻斑驳病毒（PMMoV）检测试纸条说明书

一、试剂盒组成：

PMMoV试纸条     50条

植物组织研磨袋   50个

样品提取液 50mL  1瓶

二、操作步骤：

1. 样品制备：

1.1 植物样品制备方法一：

1）植物样品的采集：从褪绿皱缩等病毒样症状明显的辣椒叶片上用手或剪刀等取1块大拇指指甲大小的1块叶片（30-50毫克），或从扭曲、皱缩等畸形、褐色的坏死状病斑和条纹的果实上用手或剪刀等取半块大拇指指甲大小的1块果实（30-50毫克），放入提供的研磨塑料袋中；

2）植物样品的搓烂和匀浆：用提供的吸管吸2管样品提取液（约1毫升）加到含有叶片的研磨袋中，双手像搓衣服一样搓塑料袋至叶片完全粉碎，并在样品提取液中混匀。

1.2 植物样品制备方法二：

1）采集褪绿皱缩等病毒样症状明显的辣椒叶片，称重后取约30-50毫克的叶片组织放到研钵中；或采集扭曲、皱缩等畸形、褐色的坏死状病斑和条纹的果实，称重后取约30-50毫克的果实组织放到研钵中；

2）研钵中加入1毫升的提取液后用研棒研磨匀浆1分钟；

3）匀浆液移至1.5毫升塑料离心管中，5000转/分钟离心3 分钟，或静置3分钟，上清即为样品检测液。

2.样品检测：

从铝箔袋中取出试纸条，如下图所示将其正面朝上平放，用吸管吸取上述制备好的样品提取液滴3-4滴到加样孔中。

4. 结果判读：

在3~10分钟内观察结果，如下图中1所示，在C线（对照线）和T线（检测线）位置均出现显色为阳性结果；如下图中2所示仅在C线显色而T线不显色为阴性结果；若C线和T线均未显色，或仅在T线显色 而C线不显色，说明该试纸条失效。

三、注意事项：

1.      检测植物时，取病叶量不能多，严格控制取样量，半个或一个大拇指指甲大小已足够了，取太多的叶片的话叶片中的叶绿体会影响检测显色的，而且该试纸条检测灵敏度是非常高的，不会存在取样品量不足造成假阴性的现象；

2.      试纸条保存于干燥密封铝箔袋中，现用现取；

3.      试纸条用于PMMoV的检测；

4.      取样时应采集病毒症状明显的番茄叶片。PMMoV感染辣椒植物的症状包括：叶片褪绿皱缩，茎秆上出现褐色坏死斑，果实扭曲、皱缩、畸形、变小，有时果实出现褐色的坏死状病斑、变色条纹和环纹，植株发育不良。

5.      用手、剪刀或刀片取样，每取完一次样品均需用自来水清洗干净；

6.      胶体金试纸条必须用提供的样品提取液，不能用其它样品提取液；

7.      每根吸管只能用于1个样品的吸取和加样，禁止同一根吸管用于多个样品的吸取和加样。

四、贮存条件： 4℃～35℃常温避光保存，切勿冷藏或冷冻。

五、生产日期和有效期：生产日期详见包装盒，有效期为24个月。